SDS-PAGE凝胶电泳技术 SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺(àn )凝胶电泳,是(❌)生(shēng )物化学(🛰)和分子生物学实验中常用的蛋(dàn )白质分离和鉴定技术,这(zhè(🏆) )项技术的基本原理是利用蛋白质在(🍡)电场中的迁移率与其(qí )分子量成(🦏)(chéng )反比的关系,通过添加(jiā )阴离(💭)子(zǐ )洗涤剂SDS(十二(èr )烷基硫酸(🤤)钠(nà ))使蛋白质带上负电荷,从而消除了蛋白质原有的电荷差异(💕),使得蛋(dàn )白质的迁移仅受其大小的影(yǐng )响。 操作步骤方(🏤)(fāng )面,首先需要制备(bèi )适当浓度和pH值的聚丙烯(🏗)酰胺凝胶,然后将含有SDS和还(hái )原剂的(🏃)蛋白质样品加入凝(níng )胶(jiā(🛩)o )孔中,通电后,蛋(dàn )白质开始根(gēn )据(😀)大小分(🕢)离,小分子蛋白(bái )质移动得(🛁)更快(kuài ),而大分子蛋白质则较慢,通过染色或西方印(yìn )迹(📖)等方法可以检测和分析蛋白质。 应用范(fàn )围广泛,SDS-PAGE不仅用于(🕹)蛋白质(zhì )分子(🕙)量的测定,还广泛(fàn )应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋(dàn )白质变性和复性(xìng )研究以及(jí )蛋(dàn )白质-蛋白质相互作用的研究,它也是研究蛋白质翻译后(hòu )修饰的重要工具。 尽管SDS-PAGE是一种强大的(🤑)分析工具,但它(tā )也有局限性(xìng ),对于极端大小的蛋白质,分(fèn )辨率可能会降低;某(🕯)(mǒu )些蛋白质可能(✨)因为结构(gòu )的特殊性(🥩)而在凝胶中的迁移不(bú )符合预期(qī ),在(zài )进行SDS-PAGE分析时,通(tōng )常需要结合其他生化和(hé )分子生物学技术以(yǐ )获得(dé )更准确的(de )结果。