SDS-PAGE凝(🏷)胶电泳技(jì )术 SDS-PAGE凝胶电泳,即(🚐)聚丙烯酰胺凝胶(🍚)电泳,是生物化学和分子生物学实验中常(😜)用的蛋白质分(fèn )离和鉴定技术,这(zhè )项技术的基本原理是利用蛋白质在电(🍲)场中的(de )迁移率与(🏀)其分子量成反比的关系,通(tōng )过添加阴离(lí )子洗涤剂SDS(十二烷基硫(liú )酸钠)使蛋白质带上(shàng )负电(diàn )荷,从而消除(🦋)了蛋白(bái )质原有的电荷(hé )差异,使得蛋白质的迁移仅受其(📏)大小的(de )影响。 操作步骤(💄)方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚丙烯酰(xiān )胺凝胶(🌖),然后将含有SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝(níng )胶孔(kǒng )中,通电后,蛋白质(zhì )开始(shǐ )根据(jù )大小(xiǎo )分离,小分子蛋白质(🏊)移动得(dé )更快,而(⏲)大分子(zǐ )蛋白质则较慢,通过染色或西方印迹等方法可以(yǐ )检测和分析(xī )蛋白质。 应(㊗)用范围(wéi )广泛,SDS-PAGE不仅用于(yú )蛋白质分子量(🍀)(liàng )的测定,还(✏)广泛应用于蛋白质纯化程度(🕷)的分析、(💒)蛋白质变性和复性研究以及蛋白质-蛋(dàn )白质相(xiàng )互作用的研究,它(tā )也是研究蛋白质翻译后(🎈)修(xiū )饰的重(❕)要(yào )工具。 尽管SDS-PAGE是一种(zhǒng )强大的分析工(gōng )具,但它也有局限(xiàn )性,对于极端大小的蛋白质(zhì ),分辨率可能会降低;某(😶)些蛋白(bái )质可能因为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不(bú )符合预期,在进行SDS-PAGE分析时(🥩),通(tōng )常需要结合其他(💰)生(shēng )化和分子生物学技术以获得更准(zhǔn )确的结(🦌)果。