SDS-PAGE凝胶电泳技术 SDS-PAGE凝胶电泳(🕒),即聚丙烯酰(🍇)胺凝(níng )胶电泳,是生物(🍜)化学和分(fèn )子生物学实(🛶)验(😇)中常用(yòng )的(de )蛋白质分离和鉴定(dìng )技术(shù ),这项技(⏰)术的基本原理是利用(💎)蛋白质(zhì )在电场中的迁移率(lǜ )与其分子量成反(🐧)(fǎn )比的(❤)关系,通过(🕦)添加阴离子(zǐ )洗涤剂SDS((💥)十二烷基硫酸(🚈)钠(🦌))使蛋白质带上负电荷,从而消除了蛋白质原有的电荷差异,使得蛋白质的迁(qiān )移仅(jǐn )受其大小的(de )影响。 操作步骤方面,首先需要制(🌜)备(bèi )适当浓度和pH值(zhí )的聚丙烯酰(xiān )胺(♈)凝胶,然后将含有SDS和还原(yuá(🌤)n )剂的蛋白质(🤢)样品加入凝(níng )胶孔(kǒng )中,通电后,蛋白质开始根(✌)据大小分离,小分子(zǐ(🥛) )蛋白质移动得更快(kuài ),而大分子蛋白(bái )质则较慢,通过染色或(huò )西方印迹(jì )等方法可以检测和分析蛋白质。 应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于(yú )蛋白质分子量的(de )测定,还广泛应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋白(bái )质(zhì )变性和复性研究(jiū )以及蛋白质-蛋白质相互作用(yòng )的研究,它也是研(yán )究蛋白质翻译后修饰的重(chó(🥌)ng )要工具。 尽管(guǎn )SDS-PAGE是一种强大的分析工(gōng )具,但它也有(🛃)局限性(xìng ),对于极(jí )端大小的(de )蛋白质,分辨率可能(néng )会降低;某些蛋(🌡)白质(zhì )可能因为结构的特殊性(👘)而(ér )在凝胶中的迁移不(🔎)符合预期(📯),在进行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分(fèn )子生物(wù )学技术以(🎇)(yǐ )获得更准确的结果。