SDS-PAGE凝胶(🦎)电泳(yǒng )技术 SDS-PAGE凝胶电泳(yǒng ),即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和分子生物学实验中常用的蛋白质分离和鉴定(🍴)技(🕥)术,这项技术的基本(💱)原(yuán )理是利用(yòng )蛋白质(zhì )在电场中的迁(qiān )移率与其分(fèn )子量成反(fǎn )比的关系,通过添加阴离子洗涤(dí )剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质(zhì )带上负电(diàn )荷,从而(ér )消(💣)除(chú )了蛋白质原有的电荷(hé(🐭) )差异,使得蛋白质的迁移仅受其大小(xiǎo )的影响。 操(cāo )作步骤方面,首先需要制备(bèi )适当浓度和pH值的聚丙(🌸)烯(xī )酰胺凝胶,然(🕓)后将含有(📕)SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白(bá(♈)i )质开(kāi )始根据大(🐢)(dà )小分离,小分子蛋(dàn )白质移动得(dé )更快,而(😐)大(🐼)分子蛋白质则较慢,通过染色或西方印迹等方法可以检测和分析蛋白质(🌨)。 应用范(🌚)围(wéi )广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还广泛应用于蛋白质(zhì )纯化程度的分析、(🤕)蛋(🕴)白质变性和复性研究以及蛋白质-蛋白质相(🗜)互作用的研究,它也是研究蛋白质(👪)翻译后修饰(shì )的重(🚄)要工具。 尽管(🥄)SDS-PAGE是一种强大的(de )分析工具(jù ),但它(🎩)也有局限性,对于极端大小的蛋(dàn )白质,分辨率可能会降低;某些蛋白质可(👡)能(néng )因为结构(👘)的特殊性而在凝胶中的迁移不符(fú )合预期(qī ),在进(jìn )行SDS-PAGE分析时,通常需要结合(hé )其(qí )他生化和(hé )分(fèn )子生物学技术(shù )以获(🈁)得更准确的结(jié )果。